處理羊ELISA試劑盒需要注意什么
更新時(shí)間:2021-12-16 點(diǎn)擊次數:1594次
處理羊ELISA試劑盒我們首先需要在實(shí)驗前1小時(shí)將羊ELISA試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復到室溫,以使結果更穩定。實(shí)驗時(shí),要使底物避光保存,用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確,吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差,要保證移液槍的準確性,誤差不能超過(guò)百分之2。
1、血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過(guò)程中如出現沉淀,應再次離心。
2、血漿:應根據羊ELISA試劑盒的標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),保存過(guò)程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3、尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應再次離心。
4、細胞培養上清:檢測分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應再次離心。
5、組織標本:切割標本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS,用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6、標本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻進(jìn)行,提取后應盡快進(jìn)行實(shí)驗。若不能馬上進(jìn)行ELISA試劑盒試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。