隨著(zhù)分子生物學(xué)和細胞生物學(xué)研究的不斷發(fā)展，轉染已經(jīng)成為研究和控制真核細胞基因功能的常規工具。細胞轉染實(shí)驗是現代生物學(xué)研究中的重要技術(shù)手段之一。通過(guò)將外源DNA、RNA、蛋白質(zhì)等引入目標細胞的實(shí)驗技術(shù)之一，研究者們可以揭示細胞的基因功能、蛋白質(zhì)表達和相互作用，進(jìn)而深入理解細胞生理過(guò)程和疾病發(fā)生機制。接下來(lái)我來(lái)為大家介紹一下常見(jiàn)的細胞轉染方法吧

1.化學(xué)物質(zhì)介導：磷酸鈣共沉淀法、脂質(zhì)體轉染方法

1）磷酸鈣共沉淀法：借助于形成一種DNA-磷酸鈣復合物沉淀黏附在細胞膜表面，通過(guò)細胞的內吞作用而使DNA被細胞捕獲。沉淀顆粒的大小和質(zhì)量對于轉染的成功至關(guān)重要，也受pH值、鈣離子濃度、DNA濃度、沉淀反應時(shí)間、細胞孵育時(shí)間等因素影響?？蛇m用于穩轉瞬轉，操作簡(jiǎn)便花費相對較低，但轉染效率低，10-20%，并且重復性很差。

2）脂質(zhì)體轉染：帶正電的脂質(zhì)體與帶負電的核酸磷酸基團形成DNA-陽(yáng)離子脂質(zhì)體復合物，再與細胞膜上的唾液酸殘基的負電核結合，可能經(jīng)過(guò)內吞作用被導入細胞。該方法使用簡(jiǎn)單，可攜帶大片段DNA，通用于各種類(lèi)型的裸露DNA或RNA，能轉染各種類(lèi)型的細胞，轉染效率、轉染的穩定性和可重復性大大提高。但轉染時(shí)需要去除血清，血清的缺失會(huì )導致細胞毒性增加；轉染效果也隨細胞類(lèi)型變化大。

2. 物理物質(zhì)介導：電穿孔法、顯微注射

1）電穿孔法：電穿孔是通過(guò)高強度的電場(chǎng)作用破壞細胞膜電位，瞬時(shí)提高細胞膜的通透性，從而吸收周?chē)橘|(zhì)中的外源分子。電穿孔法可適用于所有細胞類(lèi)型的瞬時(shí)和穩定轉染，但是其高電壓脈沖導致細胞致死率非常高，并且對DNA和細胞的用量很大。

2）顯微注射：需要使用精密的儀器，直接將外源性核酸注射至宿主細胞核內。多用于轉基因，由宿主基因組序列可能發(fā)生的重組，缺失，復制或者異位等現象使外源基因嵌入宿主的染色體中。但是轉染細胞數有限,多用于工程改造或轉基因動(dòng)物的胚胎細胞。

3. 生物物質(zhì)介導：病毒介導法

1）逆轉錄病毒(RNA)：通過(guò)病毒侵染宿主細胞的機制將外源基因整合到宿主細胞的染色體中，導致基因失活或激活癌基因，構建穩轉株?？梢杂糜陔y轉染的細胞，原代細胞，體內細胞等，但攜帶基因不能太大（<8kb）:,需考慮安全因素。

2）腺病毒(雙鏈DNA)：腺病毒除了卵細胞以外幾乎在所有已知細胞中都不整合到染色體中，因此不會(huì )干擾其它的宿主基因。瞬時(shí)表達，可以包裝8kb左右外源基因，轉染較容易，但是轉染效率不高。

細胞轉染實(shí)驗作為一種重要的實(shí)驗手段，為我們探索細胞內的奧秘提供了有效的工具。根據實(shí)驗需求和細胞特性，選擇合適的轉染方法非常重要。像細胞狀態(tài)和密度、培養基、載體大小等多方面因素都會(huì )影響到我們最后的轉染效率，所以細胞轉染是一個(gè)常見(jiàn)但是卻并不簡(jiǎn)單的實(shí)驗。