問(wèn)題一、在加液的時(shí)候,如果不用多道移液器,對結果有影響嗎?
技術(shù)分析:對于熟練的技術(shù)人員來(lái)說(shuō),可能影響不會(huì )很大,如果不是很熟練,結果就很難說(shuō)了。也正是因為如此,進(jìn)口的試劑盒的說(shuō)明書(shū)都要求用多道移液器或自動(dòng)加樣器加樣。
問(wèn)題二、抗原的純度達到多少?
技術(shù)分析:如果對本底要求不是很高對化,不純對抗原對包被影響不大,如果可以避免交叉反應的化,包被物中的一些雜質(zhì)有時(shí)還可以起一定的封閉作用(但僅限于),你就先用抗原包被(采用不同稀釋度),用間接法檢測。
問(wèn)題三、一般做組織的ELISA,做什么液體研磨組織較好?
技術(shù)分析:如果是檢測組織內的成分,建議采用pH在7左右離子強度不高的緩沖液研磨就可以,這樣對結果不會(huì )產(chǎn)生太大影響。
如果是采用研磨組織后包被,這要看你提取得成分在何種條件下能保持生物活性,建議用其保持生物活性的液體研磨,然后用pH9.6的碳酸鹽緩沖液透析,如果可以對話(huà),可直接用pH9.6的碳酸鹽緩沖液。
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