1.收到細胞，di一時(shí)間要鏡檢：調查細胞形態(tài)是否正常，關(guān)于貼壁細胞則要留意看貼壁狀況是否很好，調查細胞密度，有疑議及時(shí)咨供給細胞的技術(shù)人員。由于運送的時(shí)間或許溫度的改變，許多貼壁細胞在盛滿(mǎn)培育基的瓶子里成長(cháng)的狀況平和時(shí)會(huì )有點(diǎn)不一樣，主要是貼壁結實(shí)問(wèn)題。比如293T，平常貼壁就不是很牢，在裝滿(mǎn)的培育基瓶子里邊，會(huì )發(fā)生大片的脫落，細胞集合在一起，但是細胞成長(cháng)還是正常的，經(jīng)過(guò)離心搜集，加以胰酶的消化，從頭打散，又能夠正常的貼壁成長(cháng)。
2.當經(jīng)過(guò)上一步的調查，細胞初步?jīng)]有任何問(wèn)題時(shí)，進(jìn)行下一步操作。當收到的細胞密達到80%左右時(shí)，則處理如下：棄除瓶中大部分培育基，僅保留5到10mL培育所需的慣例培育基；或更換新鮮的培育基，置于培育箱中，隨后每天調查。細胞在低于正常成長(cháng)溫度狀況下，會(huì )調整為停止期，或許慢速成長(cháng)期，有必要康復37度的環(huán)境至少3個(gè)小時(shí)左右，才能從頭調整到接近對數成長(cháng)期的狀況，在對數成長(cháng)期進(jìn)行細胞的傳代會(huì )大大增加傳代的成功率，和細胞的存活率。
3.如果經(jīng)di一步調查發(fā)現細胞密度超越90%，而且細胞狀況很好時(shí)，則復溫后2個(gè)小時(shí)需求立即傳代。傳代的比例應依據不同的細胞而定。關(guān)于成長(cháng)比較快，狀況安穩，不易受外界影響的細胞能夠一次多傳幾瓶；關(guān)于成長(cháng)較慢，細胞比較薄，狀況容易動(dòng)搖的細胞類(lèi)型，一次少傳些，保證每瓶細胞密度大些，便于安穩成長(cháng)。至于一些比較生疏的細胞，di一次處理也能夠按照第二種狀況。