細胞凋亡過(guò)程中細胞核染色質(zhì)的形狀學(xué)改動(dòng)分為三期:
1,Ⅰ期的細胞核呈波紋狀(rippled)或呈折縫樣(creased),部分染色質(zhì)呈現濃縮狀態(tài);
2,Ⅱa期細胞核的染色質(zhì)高度凝集、邊緣化;
3,Ⅱb期的細胞核裂解為碎塊,發(fā)生凋亡小體
細胞凋亡的檢測辦法
1.確認有無(wú)凋亡可用Annexin v-PI 雙染,因為該辦法對前期凋亡比較敏感,假如沒(méi)測出明顯的凋亡,換其他也或許測不出。
2.用Annexin v-PI 雙染測出凋亡后,可根據標本或樣品情況挑選其它的辦法來(lái)驗證,很多高質(zhì)量的paper也只用一種辦法測凋亡。當然也要根據下一步的試驗需求,假如想進(jìn)一步確認該凋亡是線(xiàn)粒體途徑仍是逝世受體途徑,能夠檢測相應的caspase或挑選線(xiàn)粒體途徑的試劑盒等等。
3.zui簡(jiǎn)略的是形狀學(xué)的檢測,Hoechst染色,用熒光顯微鏡觀(guān)察,加上假如凋亡形狀好,出的圖畫(huà)也美麗,周期也短,很直接就能夠看到結果。還有我們都挑選的是DNAladder,過(guò)程是很簡(jiǎn)略,不過(guò)要想真的做出美麗的LADDER或許還需求下不少的功夫,還有一種是流式細胞來(lái)檢測,也不算貴,這三種應該都是用的非常多的。